Transmission congénitale de Trypanosoma cruzi à Santa Cruz, Bolivie

ContexteNous avons mené une étude sur l’infection congénitale à Trypanosoma cruzi à Santa Cruz, en Bolivie. Notre objectif était d’appliquer de nouveaux outils pour identifier les points faibles des algorithmes de dépistage actuels et trouver des moyens de les améliorer. mères infectées, échantillons de sang obtenus les jours,,,,,, et ont été concentrés et examinés au microscope; Des tests sérologiques ont été réalisés pour la journée et des spécimens. Des échantillons maternels et infantiles, y compris le tissu ombilical, ont été testés par PCR en chaîne par polymérase en PCR ciblant le minicercle du kinétoplaste et par PCR quantitative. Résultats positifs de l’examen microscopique au premier mois et aucun résultat positif au microscope du sang ombilical Résultats PCR positifs pour% de sang de cordon et% de spécimens de tissu ombilical Les femmes positives à la PCR étaient plus susceptibles de transmettre le T cruzi que les femmes séropositives Résultats de PCR P & lt; Les charges parasitaires déterminées par PCR quantitative étaient plus élevées chez les mères de nourrissons infectés que chez les mères séropositives de nourrissons non infectés P & lt; Malgré des efforts intensifs, seul un% des nourrissons à risque avait un mois de prélèvement. Conclusions: Sur la base de la faible sensibilité de la microscopie dans le sang de cordon et du taux élevé de perte de suivi, nous estimons que les programmes de dépistage actuels Les techniques moléculaires peuvent améliorer la détection précoce

Depuis, la prévalence estimée de l’infection à Trypanosoma cruzi a diminué de millions à millions suite au contrôle intensif des vecteurs et au dépistage des banques de sang Comme les autres voies de transmission ont diminué, la proportion attribuable aux infections congénitales a augmenté: La transmission congénitale peut se produire chez les femmes elles-mêmes infectées congénitales, perpétuant la maladie en l’absence du vecteur Les taux de transmission signalés par les mères infectées varient de% à>% [- Les facteurs signalés comme augmentant le risque comprennent l’âge maternel plus jeune, l’infection par le virus de l’immunodéficience humaine et un modèle animal de souche parasitaire Bien qu’un cycle enzootique autochtone et des vecteurs compétents existent dans la moitié sud du pays, les infections aux États-Unis touchent les immigrants infectés dans leur pays d’origine Un groupe de chercheurs estime Chez les femmes infectées en âge de procréer vivent aux États-Unis et que les infections congénitales T cruzi se produisent annuellement Cette estimation indique que la maladie de Chagas congénitale peut être plus fréquente que des troubles non infectieux dans le panel de dépistage néonatal recommandé par l’American College of Genetics. La plupart des infections congénitales à T. cruzi sont asymptomatiques ou provoquent des signes non spécifiques, nécessitant un dépistage en laboratoire Cependant, une faible proportion entraîne une morbidité sévère, notamment un faible poids à la naissance, une hépatosplénomégalie, une anémie, une méningoencéphalite et / ou une insuffisance respiratoire. Les nourrissons qui survivent à l’infection aiguë sont présumés présenter le même risque de maladie cardiaque ou gastro-intestinale que les autres personnes infectées au cours de la vie . Le traitement pendant l’enfance est plus efficace et mieux toléré que le traitement ultérieur. supposé réduire ou éliminer le risque de complications ultérieures Diagnostic précoce La Bolivie a un programme de dépistage congénital de la maladie de Chagas dans tous les départements où la transmission du T cruzi à transmission vectorielle est endémique Le programme utilise le dépistage sérologique prénatal, suivi d’un examen microscopique du sang de cordon Mères séropositives Pour les nourrissons qui ne reçoivent pas de diagnostic à la naissance, les tests sérologiques classiques d’immunoglobulines G IgG sont recommandés après des mois Des programmes similaires existent en Argentine et au Brésil En raison des difficultés logistiques, & lt;% Notre objectif était d’utiliser de nouveaux outils pour identifier les points faibles du dépistage actuel du T cruzi congénital et trouver des moyens d’améliorer la sensibilité et l’efficacité. Nous avons également étudié la dynamique de transmission, y compris la quantification de la parasitémie chez la mère et le nourrisson. par réaction en chaîne de polymérase en temps réel PCR Ces données représentent l’étude récente la plus complète de l’ac nombre de nourrissons de mères infectées par T cruzi, y compris un suivi systématique de la naissance à des mois, et l’utilisation de techniques de diagnostic conventionnelles et nouvelles sur toute la période

Méthodes

Cette étude a été menée à l’hôpital Universitario Japones, un hôpital public de Santa Cruz, en Bolivie. Bien que la transmission vectorielle de T cruzi soit absente, la prévalence de l’infection est élevée, car la ville agit comme un aimant économique pour les migrants des zones rurales à transmission intense. ] Le protocole a été approuvé par les comités d’éthique de l’hôpital d’étude; Asociación Benéfica Proyectos en Informática, Salud, Médicina y Agricultura Lima, Pérou; Johns Hopkins University Baltimore, MD; Après avoir obtenu un consentement éclairé écrit, des données démographiques ont été sollicitées. Un échantillon sanguin a été prélevé, centrifugé et testé par des tests de diagnostic rapides. test d’hémagglutination indirecte IHA et Trypanosoma Detect InBios International L’IHA a utilisé le kit Chagas Polychaco Lemos Laboratories avec une valeur seuil positive de: pour fournir une haute sensibilité Un sous-ensemble d’échantillons a été testé par Stat-Pak Chembio Diagnostic SystemsUne infirmière a assisté à la livraison de chaque RDT Le cordon et le placenta ont été soigneusement lavés dans un tampon salin tamponné au phosphate pour retirer le sang maternel avant l’échantillonnage. Des aliquotes de tissus ont été placées dans le tampon. % d’éthanol et dans le formol Le pédiatre traitant enregistré majo Résultats de l’examen néonatal Le sang de cordon a été placé dans des tubes de microhématocrite héparinisés, scellés et traités à l’intérieur par centrifugation, min. [diamètre du rotor, cm] suivi d’un examen microscopique. Cette méthode, appelée microméthode, est la méthode standard pour diagnostiquer congénitale. Infection à T cruzi au cours des premiers mois de vie Le spécimen ombilical à fixation de formol a été inclus dans de la paraffine, sectionné et coloré à l’hématoxyline et à l’éosine

t test InBios International et le test d’hémagglutination indirecte IHA; un sous-ensemble de spécimens ont été testés par Stat Pak Chembio Diagnostic Systems Une femme a eu un résultat IHA faussement positif Des échantillons provenant de femmes séropositives confirmées ont donné des résultats de TDR faussement négatifs; le suivi était significativement moins complet pour les nourrissons de ces femmes que pour les nourrissons de femmes ayant des résultats de TDR réellement positifs Tous les tests de laboratoire ont été réalisés par des techniciens aveugles à l’état d’infection des sujets Les échantillons maternels ont été testés par immunofluorescence. ], Test ELISA immuno-enzymatique de Chagatek; bioMérieux, et Chagatest Recombinante Laboratoires ELISA Wiener, comme décrit dans une publication antérieure Les échantillons ayant donné des résultats positifs avec ⩾ des tests conventionnels ont été considérés comme séropositifs confirmés Les nourrissons de femmes infectées ont des échantillons de sang obtenus aux,,, et À chaque visite de suivi, le sang a été examiné par microméthode, et du sang supplémentaire a été séparé en caillot et sérum pour des tests ultérieurs. Si l’infection était détectée par la visualisation du parasite à n’importe quel âge ou par des résultats sérologiques positifs, le nourrisson était Pour le traitement des échantillons de sérum maternel et infantile, nous avons effectué des transferts Western en utilisant des antigènes sécrétés par la trypomastigote sécrétée conformément aux méthodes publiées Les transferts avec des bandes claires aux poids moléculaires attendus ont été considérés comme positifs; La bande kDa sur IgG TESA-blot correspond à une infection chronique, alors que les bandes pseudo-squameuses à-kDa sur IgM TESA-blot montrent des anticorps dirigés contre les antigènes de phase aiguës SAPA, ce qui indique une infection aiguë ou congénitale [ Les bandes inférieures au kDa sont considérées comme non spécifiques. Le RCP a été réalisé en utilisant des échantillons de caillot de sang maternel et infantile et des échantillons de tissu placentaire et ombilical de mg. L’utilisation du caillot était basée sur une analyse plus sensible au caillot qu’à la couche leucocytaire ou du sang total mélangé avec de l’ADN de guanidine a été extrait selon un protocole standard phénol-chloroforme Des amplifications ont été réalisées en utilisant l’ensemble d’amorces ADN kinétoplast, comme décrit ailleurs La PCR quantitative en temps réel a été réalisée L’ensemble d’amorces Cruzi ‘-ASTCG-GCTGATCGTTTT-CGA-‘ et Cruzi ‘-AAT-TCCTCCAAGCAGCGG-ATA-‘ a été utilisé pour amplifier un ADN de paire -base Fragment La sonde Cruzi ‘-CAC-ACACTGGACAC-CAA-‘ a été marquée avec ‘FAM -carboxyfluorescein et’ MGB mineure liant rainure TaqMan humaine RNase-P réactif de détection Applied Biosystems a été inclus comme un contrôle interne Chaque réaction contenait μL de × Master Mix avec biologie appliquée à l’uracil-n-glycosylase, μL de × Taqman RNase-P, μmol / L de chaque amorce, μmol / L de sonde Cruzi et μL d’ADN extrait dans un volume réactionnel final de μL La réaction a été réalisée dans le système Opticon dans les conditions suivantes: ° C pour min, suivi de ° C pour min, pendant les cycles avec amplification ° C pour s et min à ° C Le cycle seuil a été défini comme le premier cycle dans lequel la fluorescence a été détectée au-dessus de la ligne de base Un résultat a été considéré comme valide uniquement lorsque le contrôle interne a été efficacement amplifié. Nous avons inclus des échantillons de contrôle positif dans chaque analyse PCR quantitative et vérifié leur numéro de cycle par rapport à leur numéro de cycle connu de la normei Si le nombre de cycles pour les contrôles positifs variait de plus de plusieurs cycles, l’essai a été répété. Un contrôle négatif sans matrice a été inclus dans chaque série. Le cycle du seuil a été déterminé par la courbe étalon respective pour le lot d’échantillons et était toujours entre et des cycles Un échantillon de caillot a été inoculé avec des trypomastigotes de souche x T cruzi Y, extrait et dilué successivement pour déterminer la quantité minimale détectable; la limite a été jugée parasitaire / mLA néonatologiste MdCA traité les nourrissons infectés conformément aux directives du programme bolivien de contrôle de la maladie de Chagas Les lignes directrices exigent des résultats micrométriques positifs ou des résultats positifs sur les tests sérologiques à ⩾ mois; Cependant, pour l’analyse de la recherche, nous avons considéré qu’un enfant avait une infection congénitale confirmée s’il répondait à la définition du cas du programme ou s’il avait des résultats reproductibles. La mère a été interrogée pour s’assurer que le nourrisson n’avait pas vécu dans une zone de transmission vectorielle entre la naissance et la date du spécimen positif. Des analyses statistiques ont été effectuées dans le logiciel SAS pour Windows, version SAS. Les variables catégorielles de l’Institut ont été comparées par le test χtest ou le test exact de Fisher selon le cas, tandis que les variables continues ont été analysées en utilisant le test de Kruskal-Wallis

Résultats

De novembre à juin, un total de femmes ont eu un prélèvement sanguin pré-accouchement; échantillons testés positifs au moins par TDR Figure Les échantillons provenant de femmes% ont été confirmés séropositifs; ont eu des résultats positifs par des tests conventionnels, alors que les tests ont eu des résultats positifs. Seize échantillons négatifs pour le RDT ont été confirmés séropositifs. Un échantillon InBios négatif positif à l’IHA a donné des résultats négatifs par des tests sérologiques conventionnels et a été classé comme résultat IHA faussement positif. Figure 1 Une mère séropositive a donné naissance à des jumeaux Une mère séropositive a eu un enfant mort-né, et l’enfant d’une mère séronégative est morte à l’âge de plusieurs mois Bien que de nombreuses tentatives aient été faites pour convaincre les mères de femmes séropositives confirmées avec des TDR faussement négatifs pour amener leurs enfants à tester, le suivi était beaucoup plus médiocre que pour les nourrissons de mères positives au TDR, nombre moyen de spécimens, vs [P & lt; pourcentage de nourrissons qui ont complété le suivi mensuel,% vs% [P & lt;] Dix nourrissons% ont reçu un diagnostic d’infection congénitale à T cruzi Tableau Tous les nourrissons avaient des résultats PCR positifs des échantillons du premier mois de vie. techniques était jours, par rapport aux jours pour le diagnostic moléculaire P & lt; Seuls les nourrissons ont reçu un diagnostic par microméthode dans leur premier mois, et tous les échantillons de sang de cordon avaient des résultats microméthodes négatives Deux autres nourrissons avaient des parasites visualisés dans les échantillons et jours En revanche, les résultats de PCR étaient positifs pour% d’échantillons de sang ombilical,% d’ombilical échantillons de tissus, et% des échantillons de suivi du nourrisson prélevés avant le traitement. Parmi les nourrissons non infectés, tous les échantillons de sang ombilical, de cordon ombilical et de suivi étaient négatifs à la PCR; Le spécimen d’un jour d’un nourrisson qui avait été prouvé non infecté au cours des mois était faiblement positif selon la spécificité de la PCR, les échantillons placentaires provenant de naissances étaient positifs à la PCR, y compris les spécimens provenant de nourrissons infectés, les nourrissons non infectés et les nourrissons perdus de vue au bout de plusieurs mois, mais présumés non infectés sur la base de spécimens néonataux Deux nourrissons infectés ont eu des résultats de PCR placentaires négatifs Des nids de parasite étaient visibles dans des échantillons de tissus ombilicaux provenant de nourrissons infectés Figure

Tableau View largeTélécharger la lameComparaison de la réaction en chaîne de la polymérase conventionnelle et de détection PCR ciblant l’ADN de Trypanosoma cruzi Cinéoplaste dans des spécimens prélevés chez des nourrissons nés à l’hôpital Universitario Japones, Santa Cruz, BolivieTable View largeTélécharger la lameComparaison de la réaction en chaîne par polymérase conventionnelle et de détection Cibler Trypanosoma cruzi Spécimens obtenus à partir de nourrissons nés à l’hôpital Universitario Japones, Santa Cruz, Bolivie

Figure Vue largeDownload, Nid d’amastigotes de Trypanosoma cruzi dans la section colorée à l’hématoxyline et à l’éosine du tissu du cordon ombilical proximal du nourrisson B, Nid de T cruzi montrant des formes intermédiaires entre amastigotes et trypomastigotes dans la section proximale de l’hématoxyline et de l’éosine Grossissement original, × Aucune réponse inflammatoire n’a été observée dans les échantillons de tissus du cordon ombilical infectés. Vue de la vue en grandDownload, Nid d’amastigotes de Trypanosoma cruzi dans la section hématoxyline-et-éosine du tissu du cordon ombilical proximal du nourrisson B, Nid de T Grossissement original, × aucune réponse inflammatoire n’a été observée dans les échantillons de tissus du cordon ombilical infectés La PCR quantitative a démontré des charges parasitaires plus élevées dans le tissu ombilical que dans le sang du cordon ombilical spécimens médian, contre copies / mL; P & lt; Tableau Seul% des échantillons de nourrissons positifs par PCR de l’ADN de kinétoplaste ont donné des résultats positifs de l’évaluation microscopique Bien que les spécimens microméthodes positifs aient des charges parasitaires significativement plus élevées que la microméthode -négatif spécimens médiane, vs copies / mL; P & lt ;, certains spécimens avec & gt ;, copies / mL ont donné des résultats de microméthodes négatives, alors que d’autres avec & lt; copies / mL ont été lus comme table positive

Analyse de la chaîne de la parasitémie chez les nourrissons infectés sur la base de la détection Polymérase Réaction en chaîne Ciblage par PCR Trypanosoma cruzi Kinetoplast ADN kDNA et PCR quantitative qPCR et comparaison avec microméthode, microscopie de sang hépariné concentré dans des tubes de microhématocriteTable View largeToile de téléchargement de la parasitémie chez les nourrissons infectés Réaction de polymérisation en chaîne de la polymérase Trypanosoma cruzi Kinetoplast ADN kDNA et PCR quantitative qPCR et comparaison avec microméthode, microscopie de sang hépariné concentré dans des tubes de microhématocriteLes résultats IgG TESA-blot étaient positifs pour% de femmes séropositives et négatifs pour% de femmes séronégatives chez les nourrissons Parmi les femmes séropositives,% présentaient des résultats positifs au test TESA-blot, avec des bandes à-kDa dans le sang de cordon, reflétant des anticorps maternels passivement transmis chez les nourrissons infectés avec des données TESA-blot IgM, des bandes SAPA démontrées, y,% Un nourrisson infecté a eu des résultats négatifs au test TESA-blot à la naissance mais des résultats positifs au test TESA-blot avec des bandes SAPA, en jours Chez les nourrissons non infectés, des échantillons de sang de cordon et des échantillons de suivi ont été testés; aucune n’a démontré la spécificité des bandes SAPA,% La prévalence des résultats positifs du test ELISA de Chagatek chez les nourrissons non infectés de mères séropositives a diminué de% à mois à% à mois et% à mois Figure

Figure Vue largeTélécharger Diapositive Absorbance moyenne Densité optique moins seuil pour l’ensemble du lysat épimastigote Dosage immuno-enzymatique dans des échantillons de nourrissons non infectés de mères séropositives à, et mois Les barres d’erreur représentent l’écart-type au-dessus et au-dessous de la moyenne. transfert passif d’IgG d’immunoglobulines maternelles G au cours des premiers mois de vie et confirme que la sérologie IgG conventionnelle ne doit pas être utilisée pour le diagnostic chez le nourrisson avant au moins les mois d’âge.Figure View largeTélécharger diapositive Absorbance moyenne densité optique moins la coupure pour l’ensemble du lysat épimastigote Test immuno-enzymatique Les barres d’erreur représentent l’écart-type au-dessus et au-dessous de la moyenne La courbe démontre l’élimination des anticorps IgG de l’immunoglobuline G maternelle passivement transférés au cours des premiers mois de la vie et confirme que la sérologie IgG conventionnelle ne doit pas être utilisée pour le diagnostic chez le nourrisson avant au moins des mois. Les nourrissons infectés ne diffèrent pas des nourrissons non infectés des mères séropositives en ce qui concerne le poids à la naissance, par rapport à g; P = ou score d’Apgar moyen, vs à min [P =] et vs à min [P =]; Aucune anomalie n’a été détectée lors de l’examen du nouveau-né Trois des nourrissons dont les données étaient disponibles avaient une splénomégalie lors de l’examen prétraitement à, et des jours d’âge Des nourrissons infectés avec des échantillons post-traitement disponibles avaient des résultats négatifs aux tests sérologiques et PCR. faible absorbance ELISA positive et résultats PCR négatifs au jour 1 Un nourrisson, traité au cours des jours, a eu des échantillons positifs à la PCR et des valeurs positives du test sérologique positif à et jours; deux nourrissons n’ont pas été traités, l’un parce que la famille a refusé de revenir pour le suivi, et l’autre parce que la mère et le nourrisson ont déménagé avant les résultats des tests sérologiques du mois et, lorsqu’ils ont été contactés, vivaient dans une situation non endémique. département où le traitement antitrypanosomien n’était pas disponibleNon -7% des femmes séropositives présentaient des résultats de PCR sanguins positifs Seulement% des femmes ayant des résultats de TDR faux-négatifs avaient des résultats de PCR positifs, comparé à% de ceux avec des résultats de TDR positifs P & lt; Les mères ayant des échantillons positifs à la PCR étaient significativement plus susceptibles de transmettre le T cruzi à leurs nourrissons, en supposant que tous les nourrissons sans suivi n’étaient pas infectés, par rapport à [P =, test exact de Fisher unilatéral]; Les mères de nourrissons infectés avaient également des charges parasitaires plus élevées que les mères séropositives des nourrissons non infectés, les copies [cycles] contre les copies [cycles]; P & lt ;, mais il n’y avait pas de différence d’âge P = ou de parité P =

Discussion

La microscopie du sang de cordon a une sensibilité signalée de ⩽%; un spécimen néonatal supplémentaire est souvent recommandé, habituellement au bout de quelques jours Cependant, les programmes incluent rarement des spécimens supplémentaires, car les femmes éprouvent des difficultés à revenir pour un suivi; Sur la base de cette pratique, aucun des nourrissons infectés de notre étude n’aurait reçu de diagnostics pendant la période néonatale. Malgré les efforts intensifs de nos infirmières à temps plein, seulement Chez les nourrissons, le prélèvement a été effectué sur une base mensuelle Sur la base de nos données, les programmes de routine peuvent manquer la moitié des infections congénitales annuelles à T. cruzi Les chercheurs en Argentine ont soulevé des préoccupations similaires [,,] Nos données confirment Les méthodes moléculaires augmentent considérablement la détection précoce Nous avons trouvé que la PCR était encore plus sensible dans le tissu ombilical que dans le sang ombilical, ce qui s’explique par un nombre de copies plus élevé reflétant la réplication active du parasite dans les tissus néonataux. le nouveau-né est non invasif et nécessite une logistique supplémentaire minimale au-delà de ce qui est nécessaire pour la collecte de sang de cordon, ce qui est actuellement recommandé norme de soins lors de toutes les accouchements de femmes infectées par T. cruzi Comme d’autres observateurs, nous avons trouvé une PCR placentaire positive à partir de la naissance de nourrissons non infectés et infectés; Cette découverte n’était pas inattendue et n’offre pas de pistes diagnostiques utiles Il y a plusieurs décennies, les chercheurs ont observé que les charges parasitaires augmentaient chez les nourrissons infectés après la naissance , et nous avons constaté que les charges parasitaires atteignaient des jours. Les données suggèrent que la sensibilité microméthodique actuelle est dérisoire, même dans un laboratoire de recherche très expérimenté suivant des procédures de contrôle de qualité standard, peut-être même après un test sérologique positif. en partie à cause des charges parasitaires relativement faibles à la naissance Bien qu’il soit possible que la discordance entre les résultats quantitatifs de la PCR et la détection microméthodique soit due en partie à l’hétérogénéité de la récupération de l’ADN des petits échantillons néonataux, la cohérence interne la plus grande partie de la discordance était liée à la microméthode basse nsibilité Il est à noter que les spécimens ont été transportés de l’hôpital au laboratoire tous les jours et que le délai entre la collecte et la lecture variait de quelques heures à quelques heures après la naissance; D’autres chercheurs ont noté une diminution de la morbidité associée à l’infection congénitale au fil du temps et ont suggéré que les niveaux de parasites chez les nourrissons infectés pourraient également diminuer, conduisant à une sensibilité plus faible Néanmoins, nous avons constaté que la sensibilité microscopique était plus faible. Des charges parasitaires plus élevées chez la mère étaient prédictives du risque de transmission verticale, comme documenté dans d’autres publications Bien que le recours à l’équipement spécialisé et à l’expertise limite l’utilisation de la PCR en routine, il y a un effort croissant pour incorporer ces technologies dans la Chagas congénitale. Programmes de dépistage des maladies Les tests diagnostiques rapides récemment introduits au point de service représentent une avancée majeure dans le dépistage prénatal. Cependant, les tests Stat-Pak et InBios ont des sensibilités de% et% dans cette population , et les femmes ont des résultats faussement négatifs. rarement ramené leurs bébés, malgré des consultations répétées. Les résultats des TDR commerciaux varient également géographiquement, avec une sensibilité plus faible au Pérou et au Mexique qu’en Bolivie, au Brésil ou au Honduras Parce que les TDR maintenant utilisé comme seul écran – non seulement pour les femmes enceintes, mais aussi pour les enfants dans les communautés où l’infection à T cruzi est endémique – les changements techniques pour augmenter la sensibilité des TDR à% -% valent bien l’échange d’une spécificité abaissée nécessaire pour tous les algorithmes actuels et permettrait d’identifier les résultats de TDR faussement positifs. Le dépistage du T congus congénital continue de poser un défi, même si cette voie de transmission prend une importance proportionnellement plus grande. L’étape suivante peut être l’adaptation des méthodes moléculaires à des et leur validation dans les milieux les plus nécessiteux Nos données suggèrent une stratégie alternative de dépistage de la mère puis du nourrisson avec un TDR prouvée lors des visites de vaccination de routine à l’âge Cette stratégie peut également être la plus réalisable pour les populations à risque aux États-Unis et dans d’autres régions à faible prévalence. Cependant, des études systématiques sont nécessaires pour documenter une sensibilité acceptable aux TDR. pronostic pour les nourrissons traités à l’année est égal à celui des nourrissons traités plus tôt dans la vie

Le Groupe de travail sur la maladie de Chagas

Les membres du Groupe de travail sur la maladie de Chagas au Pérou et en Bolivie comprennent Viviana Pinedo-Cancino, Lilia Cabrera, Mike Lévy, Sara Quispe, Edith Hinojosa, Nur Selum, Walter Selum, Juan Justiniano, Elisabeth de LaFuente, Milagros Bastos, Teresa Rojas, Nina Castro , Kathy Lancaster, Margaret Lin, Corrine Walker, Roméo Pomari, Eduardo Valencia, Sean Fitzwater, Susy Espetia Anco et Elizabeth Chavez

Remerciements

Nous sommes reconnaissants à Henry Bishop et Michael Arrowood d’avoir révisé les lames de tissu ombilical et fourni des images de diapositives. Soutien financier National Institutes of Health NIH; R AI-, Programme NIH Fogarty Scholars RTW, Subvention de formation NIH sur les maladies infectieuses et tropicales # T AI, et NIH Global Research Formation Subvention D TW et une fondation suisse privée Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: no conflicts