Maladie granulomateuse chronique cutanée et viscérale déclenchée par une souche de vaccin à virus de la rubéole chez des enfants présentant des déficits immunitaires primaires

Persistance du vaccin vivant contre la rubéole a été associée à un granulome chronique de la peau chez les enfants présentant une immunodéficience primaire Nous décrivons d’autres enfants avec ces résultats, y compris avec une extension viscérale à la rate

rubéole, granulome, peau, rate, vaccin Les patients atteints d’immunodéficience primaire sont sensibles aux infections sévères et / ou persistantes, fréquemment associées à des microorganismes opportunistes Les PID sont également associées à des troubles immunopathologiques, notamment des granulomatoses, caractérisées par l’accumulation d’histiocytes épithélioïdes mononucléaires. Les granulomes sont classiquement associés à des déclencheurs microbiens, mais les tentatives d’identification des micro-organismes causaux ou des antigènes échouent fréquemment, et les granulomes sont donc considérés par défaut comme une conséquence de la dérégulation immunitaire . Ces processus ont été décrits dans un grand groupe d’immunodéficiences primaires, telles que la maladie granulomateuse chronique, l’immunodéficience variable commune, diverses immunodéficiences des cellules T y compris l’hypoplasie des cartilages ou l’ataxie-télangiectasie, ainsi que les déficiences du gène RAG activant la recombinaison hypomorphique Nous avons récemment y ont rapporté des cas de granulomes cutanés étendus et persistants déclenchés par le vaccin vivant RV de la rubéole dans le contexte des immunodéficiences primaires des lymphocytes T Nous renforçons ces observations en signalant d’autres cas, présentant une atteinte viscérale du granulome associé au RV.

PATIENTS ET MÉTHODES

Tous les patients présentaient un granulome cutané étendu et persistant cutané semblable Tableau dans le contexte de PID ataxie-télangiectasie n =, hypomorphic RAG carence n =, phosphoinositide activé – syndrome kinase δ n =, et immunodéficience combinée de cause inconnue n = Tous les patients reçus ou injections Chez tous les patients, les résultats de la biopsie cutanée ont confirmé le diagnostic de «granulome non-sarcoïdose», correspondant principalement à une infiltration histiocytaire et lymphocytaire mineure. Figure supplémentaire S Aucun agent infectieux a été identifié par des méthodes conventionnelles données non montrées Granulome multiviscéral progressif développé chez le patient voir Tableau de rapport des cas Statut des patients Diagnostic sexuel des patients CD Nombre de cellules NADIR, CELLULES / AUTRES MARQUEURS D’IMMUNODEFICIENCE CELLULAIRE Hypogammaglobulinémie Âge à la vaccination, âge à l’apparition des lésions cutanées , mo Rubella RT-PCR et résultats de l’IHC échantillon tissu; Âge au moment de l’échantillonnage, mo a F Ataxie-télangiectasie Faible granulome cutané PCR positif présent; PCR granulome cutané positif; ; Granulome cutané IHC positif; ; Ganglion lymphatique lymphomateux positif à la PCR; a M Activation de la phosphoinositide -kinase δ b Nombre faible de cellules naïves CD Présent et granulome cutané PCR positif et; Granulome cutané IHC positif; ; PCR peau saine négative; a F Ataxie-télangiectasie Faible Granulome cutané présent et PCR positif; PCR négative peau saine; F Déficit immunitaire combiné non défini Nombre de CDN naïfs et de cellules NK présents NA NA Granulome cutané PCR positif; Carence en M RAG Faible Granulome cutané présent et PCR positif; ; Un granulome de la rate PCR et IHC positif; ; Granulome cutané PCR positif; ; PCR peau saine négative; F Ataxie-télangiectasie Nombre de cellules naïves CD faible Présente un granulome cutané PCR positif; Carence en F RAG Faible Granulome cutané PCR positif présent; PCR négative peau saine; M Ataxie-télangiectasie NA Granulome cutané présent et PCR positif; M Ataxie-télangiectasie Faible Granulome cutané présent et PCR positif; Diagnostic de sexe du patient CD Nombre de cellules NADIR, CELLULES / μL OU AUTRES MARQUEURS D’IMMUNODEFICIENCE CELLULAIRE Hypogammaglobulinémie Âge à la vaccination, âge à l’apparition des lésions cutanées, résultats de la RT-PCR et de l’IHC échantillon Tissu échantillon; Âge au moment de l’échantillonnage, mo a F Ataxie-télangiectasie Faible granulome cutané PCR positif présent; PCR granulome cutané positif; ; Granulome cutané IHC positif; ; Ganglion lymphatique lymphomateux positif à la PCR; a M Activation de la phosphoinositide -kinase δ b Nombre faible de cellules naïves CD Présent et granulome cutané PCR positif et; Granulome cutané IHC positif; ; PCR peau saine négative; a F Ataxie-télangiectasie Faible Granulome cutané présent et PCR positif; PCR négative peau saine; F Déficit immunitaire combiné non défini Nombre de CDN naïfs et de cellules NK présents NA NA Granulome cutané PCR positif; Carence en M RAG Faible Granulome cutané présent et PCR positif; ; Un granulome de la rate PCR et IHC positif; ; Granulome cutané PCR positif; ; PCR peau saine négative; F Ataxie-télangiectasie Nombre de cellules naïves CD faible Présente un granulome cutané PCR positif; Carence en F RAG Faible Granulome cutané PCR positif présent; PCR négative peau saine; M Ataxie-télangiectasie NA Granulome cutané présent et PCR positif; M Ataxie-télangiectasie Faible Granulome cutané présent et PCR positif; Abréviations: IHC, immunohistochimie pour le virus de la rubéole; mois, mois; NA, non disponible; NK, tueur naturel; PCR, amplification en chaîne par polymérase; RT, reverse-transcriptasea Rapport de cas publié dans b Antérieurement soupçonné d’être le syndrome de Simpson-Golabi-Behmel

Rapport de cas Patient

Immunodéficience combinée avec lymphopénie lymphocytaire T profonde et hypogammaglobulinémie diagnostiquée chez des patients âgés de plusieurs années dans le contexte d’infections bronchopulmonaires répétées. Prophylaxie anti-infectieuse prescrite avec triméthoprime-sulfaméthoxazole, azithromycine et traitement substitutif par immunoglobulines intraveineuses Deux mutations faux-sens hétérozygotes dans RAG pHD et les pYC ont ensuite été identifiés, codant pour RAG, qui est impliqué dans la recombinaison VDJ Ce patient avait également des nodules violents ulcéreux sous-cutanés confluents progressifs sur son bras droit Figure supplémentaire S, panneau et jambe quand il avait ½ an, qui persistait, malgré des traitements anti-infectieux et anti-inflammatoires locaux L’hépatosplénomégalie progressive était également présente depuis l’enfance et la thrombocytopénie périphérique apparue chez les adolescentes, concomitante à l’aggravation des lésions cutanées et au lymphœdème de la jambe droite à l’âge de 1 an, tomodensitométrie thoraco-abdominale Adénomégalies médiastinales, bronchectasie des lobes médian et inférieur droit, lésions nodulaires et micronodulaires diffuses dans le parenchyme pulmonaire Figure complémentaire S, panel et foie et rate hétérogènes L’imagerie par résonance magnétique de la cheville droite adjacente aux lésions cutanées a montré des lésions intra-osseuses micronodulaires diffuses après injection de gadolinium Figure supplémentaire S, panel Des échantillons de biopsie cutanée ont révélé un infiltrat d’histiocytes épithélioïdes mononucléaires et peu de cellules géantes non représentées Les résultats de l’examen direct et de la culture des échantillons de biopsie étaient négatifs La nature granulomateuse du processus multiviscéral pathogène a été confirmée par analyse histologique et échantillons de biopsie pulmonaire et spécimen de rate obtenus après splénectomie subtotale lorsque le patient était âgé de plusieurs années, dans le cadre d’une évaluation de transplantation de cellules souches préhématopoïétiques. L’examen d’échantillons de biopsie splénique a révélé de nombreux et épithélioïdes nonnécrotiques coalescentes. Nulsomes à travers la pulpe rouge et blanche Complémentaire Figure S, panneaux et réaction en chaîne par polymérase de la transcriptase inverse RT-PCR et immunohistochimie pour détecter RV ont été réalisées sur des échantillons de peau granulomateuse et de biopsie de la rate

Échantillons et extraction d’acides nucléiques

Les biopsies de peau granulomateuse, de rate, de sérum sanguin sain, de plasma et de globules sanguins mononucléaires ont été réalisées. Tableau et Tableau supplémentaire S L’ARN total a été extrait d’échantillons de biopsie tissulaire selon la procédure TRIzol Thermo Fisher Scientific et purifié avec le RNeasy Mini colonnes Qiagen, traitées avec DNAse Des acides nucléiques ont été extraits de fractions liquides de sérum et de plasma à l’aide du QIAamp cador Pathogen Mini Kit Qiagen

Détection RV avec immunohistochimie, RT-PCR et analyse de séquence

Des détails sur la RT-PCR et l’alignement de la séquence avec l’accession à la souche Wistar / RV atténuée No FJ et l’immunochimie effectuée en utilisant un anticorps monoclonal anti-capside de la capside Abcam ab sont fournis comme matériel supplémentaire

RÉSULTATS

Détection RT-PCR de la souche Wistar du vaccin anti-RV / dans le granulome de la peau et de la rate

Guidée par les résultats obtenus pour les premiers patients , la détection RV a été réalisée par RT-PCR avec couple d’amorces F / SPR chez les patients supplémentaires avec PID et granulome de cause inconnue. Des résultats positifs ont été enregistrés pour tous les patients. La séquence de Table Amplicons a montré la plus haute identité et la plus grande similitude avec la souche vaccinale RV Wistar / chez chaque patient. Figure S et Tableaux S-S La peau saine des patients, échantillonnée de façon concomitante, était négative péristaltisme. RV avec développement du granulome Un spécimen splénique du patient a également été trouvé RT-PCR positif pour la souche RV Wistar / Toutes les fractions sanguines du sérum, du plasma et du culot mononucléaire du sang périphérique étaient négatives pour ce patient du tableau supplémentaire S

Détection de la capside de RV par immunohistochimie dans le granulome de la rate

Une immunohistochimie a montré la présence d’un fort signal cytoplasmique avec un anticorps dirigé contre la capside RV dans de nombreux macrophages du granulome épithélioïde splénique. Aucun signe supplémentaire n’a été détecté parmi les granulomes épithélioïdes témoins chez des patients non immunodéficients ou dans des échantillons de biopsie d’un patient tuberculeux. granulomes non montrés Des échantillons de peau et de foie n’étaient pas disponibles pour l’immunohistochimie

DISCUSSION

Nous rapportions précédemment qu’une souche de vaccin VR peut persister pendant des années chez les enfants atteints de PID et est associée à un granulome cutané. Nous rapportons ici une plus grande série de patients atteints de granulome et d’immunodéficience primaire. Tous les patients testés Figure S, patients et, en faveur de l’hypothèse de la persistance de la souche du vaccin anti-RV et de l’évolution intrahostale progressive, plutôt que des réinfections récentes de contacts vaccinés Conclusions chez le patient, un enfant présentant une carence hypomorphique en RAG et l’immunodéficience combinée, montrent que le granulome associé à une souche de vaccin VR peut être un processus viscéral, car les protéines de capside RV ont également été trouvés dans le granulome splénique Bien que non échantillonnés dans le cadre de la prise en charge standard du patient et le foie peut également être raisonnablement attribué au même processus Une carence profonde en lymphocytes T a été identifiée Les vaccins vivants sont donc contre-indiqués chez les patients présentant une immunodéficience primaire des lymphocytes T, mais leur diagnostic peut être confirmé par la présence d’un micro-organisme atténué. retardé jusqu’après la période de vaccination des nourrissons , et les infections chroniques associées au vaccin vivant ont été décrites dans ce contexte Le spectre complet des maladies associées aux RV après la vaccination ainsi que le type d’immunodéficience concernait les lymphocytes T, les lymphocytes B, l’immunité antivirale innée reste à définir avec précision La persistance à long terme de la souche sauvage de type rubéole a été proposée chez les patients arthropathiques, mais une relation causale n’a jamais été formellement établie Plus récemment, un cas bien documenté d’uvéite associée au VD a été décrit. chez un patient d’un an sans virémie RV contemporaine Mutations dans le RAG ou Les gènes RAG chez l’homme sont associés à un large spectre de phénotypes cliniques , et l’association avec le granulome, l’auto-immunité et les auto-anticorps a été rapportée [,,] Nos résultats suggèrent que la formation de granulomes pourrait également être associée à xenoantigènes Dans les cas rapportés ici, les antigènes RV ont été mis en évidence dans les macrophages granulomateux, ce qui est cohérent avec sa distribution chez les patients infectés par la rubéole congénitale congénitale Ce tropisme des macrophages joue un rôle dans la formation des granulomes. association forte de RV avec la maladie granulomateuse, car toutes les lésions testées chez des enfants présentant au moins un granulome cutané, dans le contexte de DIP avérées ou présumées, étaient positives pour RV, alors que les résultats étaient négatifs pour la peau saine des patients et témoins et Tableau À notre connaissance, le RV est le premier virus décrit comme fortement associé à des granulomes Dans notre conclusion, nous avons démontré la persistance, pendant des années, d’une souche de vaccin anti-RV chez une série de patients atteints de PID et son association avec le développement de l’immunodéficience humaine. granulomes de la peau et de la rate L’expression persistante des antigènes RV dans les macrophages dans les granulomes en fait le déclencheur probable de la formation de granulomes

Remarques

Remerciements Nous remercions les patients et leurs familles Nous remercions le personnel de la Clinique Clinique et Accès aux Ressources Biologiques Institut Pasteur pour la prise en charge des prélèvements cliniques, Sarah Temmam pour ses conseils en phylogénie, et Christine Labreze et Franck Boralevi pour la prise en charge des patients. ANR – LABX – IBEID Conflits d’intérêts potentiels TJM a reçu des honoraires de Merck pour l’adhésion au conseil d’administration et de Gilead pour le voyage Tous les autres auteurs ne signalent aucun conflit potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués