Klebsiella pneumoniae Klebsiella pneumoniae résistant à la colistine, Klebsiella pneumoniae Carbapenemase KPC-productrice appartenant au clone international d’épidémies ST

Cinq cas d’infection dus à K pneumoniae Klebsiella pneumoniae carbapénémase résistante à la colistine appartenant au clone épidémique international ST sont survenus au bout d’un mois. Ces cas ont probablement représenté à la fois l’émergence de résistance et la transmission d’un organisme résistant. Les isolats résistants à la colistine persister en l’absence de pression sélective in vitro

Klebsiella pneumoniae qui produit K pneumoniae carbapénémase KPC s’est rapidement répandu dans les hôpitaux du monde entier au cours de la dernière décennie. Les isolats de K pneumoniae productrices de KPC sont généralement résistants aux carbapénèmes ainsi qu’aux pénicillines, aux céphalosporines, aux fluoroquinolones et fréquemment aux aminoglycosides. K pneumoniae est donc généralement traitée avec un régime contenant de la colistine Cependant, le développement de la résistance à la colistine a été rapporté Nous rapportons ici des cas d’infection dus à K pneumoniae KPC résistant à la colistine, dont unité de soins intensifs, au cours des mois

Méthodes

Trois isolats de K pneumoniae producteurs de KPC résistants à la colistine et résistants à la colistine, y compris des paires d’isolats sensibles et résistants provenant des mêmes patients, ont été prélevés chez des patients admis dans l’unité de soins intensifs de transplantation TICU; patients A-D et un patient qui a été admis à un patient de la salle médicale E entre Février et Mai Tableau Le TICU et le service médical sont situés dans les hôpitaux qui sont reliés les uns aux autres à travers plusieurs passages

Tableau Caractéristiques des patients et des isolats Âge du patient en années Sexe Dates d’hospitalisation Diagnostic Unité de localisation, hôpital Isolat Spécimen Date d’isolement Traitement à la colistine, jours / DDD CMI, μg / mL Type de séquence KPC PFGE Résultat A Homme Jan – Mar Cholangite, OLTx Surgical, A Une urine Jan Aucun Un TICU survécu, A A Bl Mar / & gt; A B Féminin Jan – Sep Pancréatite hémorragique, Tx multiviscérale, A B Sang Mar Aucun A Survie TICU, A B Blessure Apr / & gt; A C Mâle Mar – Mar, Mar – Apr Cholangite, OLTx chirurgical, A C Mar de sang Aucun & gt; A Survécu D Homme Fév – Mai Abcès intra-abdominal, OLTx TICU, A D Sang Avril Aucun A Mort TICU, A D Sang Apr / A E Féminin Mar – Mar, Mai – Mai TBI, UTI Médecine, B E Urine Mai Aucun A Survivant Patient Âge en années Sexe Dates d’hospitalisation Diagnostic Unité de localisation, hôpital Isolat Spécimen Date d’isolement Colistin, jours / DDD CMI, μg / mL Type de séquence KPC PFGE Résultat A Homme Jan – Mar Cholangite, OLTx chirurgical, A A Urine Jan Aucun A survécu TICU, A A Mar blessé / & gt; A B Féminin Jan – Sep Pancréatite hémorragique, Tx multiviscérale, A B Sang Mar Aucun A Survie TICU, A B Blessure Apr / & gt; A C Mâle Mar – Mar, Mar – Apr Cholangite, OLTx chirurgical, A C Mar de sang Aucun & gt; A Survécu D Homme Fév – Mai Abcès intra-abdominal, OLTx TICU, A D Sang Avril Aucun A Mort TICU, A D Sang Apr / A E Féminin Mar – Mar, Mai – Mai TBI, UTI Médecine, B E Urine Mai Aucun A Survécu NOTE MIC, concentration minimale inhibitrice; OLTx, transplantation hépatique orthotopique; Tx, transplantation; TBI, lésion cérébrale traumatique; TICU, greffe ICU; DDD, dose quotidienne définie; ST, type de séquence multilocus; PFGE, électrophorèse sur gel à champ pulsé Les patients de l’étude étaient situés dans les mêmes unités pendant les périodes de temps suivantes: -AB: // – //, // – // – ABD: // – // – BD: // – //, // – //, // – //, // – // – AD: // – // – BC: // – //, // – //, // – // – CD: // – //, // – //, // – // – BCD: // – // Voir Grandes concentrations inhibitrices minimales Les CMI de divers antimicrobiens ont été déterminées par la dilution de gélose selon les directives de la Clinique et du Laboratoire. Le gène de la β-lactamase de type KPC a été identifié par réaction en chaîne par polymérase et séquençage électrophorèse en champ pulsé PFGE a été réalisée en utilisant l’enzyme de restriction Spel pour déterminer la parenté génétique des isolats cliniques. En outre, typage de séquence multilocus MLST a été réalisée comme décrit autre part ; les types de séquence ont été déterminés en utilisant le site Web MLST de K pneumoniae http: // wwwpasteurfr / recherche / genopole / PF / mlst / Kpneumoniaehtml Des expériences de compétition de croissance ont été réalisées en utilisant des paires d’isolats résistants à la colistine et résistants à la colistine des mêmes isolats B / B et D / D dans le bouillon Luria-Bertani en l’absence de colistine En bref, un nombre égal d’unités CFU provenant des deux isolats ~ CFU / mL ont été mélangés à des heures précises et incubés à ° C sous agitation. Toutes les heures, le mélange bactérien a été dilué avec du bouillon Luria-Bertani préchauffé et le pourcentage d’isolats résistants à la colistine a été estimé en inoculant des plaques d’agar sans colistine et colistine contenant μg / mL Comme témoin, la même procédure expérimentale a été réalisée en utilisant des cultures pures de colistine. isolats résistants à la colistine Cette procédure a été répétée pendant plusieurs jours consécutifs

RÉSULTATS

Les isolats de tous les patients hébergeaient le gène KPC Le séquençage a confirmé qu’il s’agissait de KPC- dans tous les cas Ces isolats de K pneumoniae productrices de KPC étaient résistants aux carbapénèmes ertapénème, imipénème, méropénem et doripénème, céphalosporines, pénicillines et aztréonam. , les isolats sensibles à la colistine présentaient une CMI de la colistine de μg / mL et étaient également sensibles à la CMI de la tigécycline, μg / mL. Leurs homologues résistants à la colistine présentaient des CMI de la colistine ≥ μg / mL, mais demeuraient sensibles à la tigécycline

Tableau Concentrations minimales inhibitrices de K pneumoniae sensible et sensible à la colistine μg / mL Patient isolé Date TZP FEP ATM ERT IPM MEM DOR GÉN AMC CIP TGC CST A A // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; A A // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; B B // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; B B // & gt; / & gt; & gt; & gt; C C // & gt; / & gt; & gt; D D // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; D D // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; E E // & gt; / & gt; & gt; & gt; Patient isoler Date TZP FEP ATM ERT IPM MEM DOR GEN AMK CIP TGC CST A A // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; A A // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; B B // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; B B // & gt; / & gt; & gt; & gt; C C // & gt; / & gt; & gt; D D // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; D D // & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; E E // & gt; / & gt; & gt; & gt; NOTE TZP, pipéracilline / tazobactam; FEP, céfépime; ATM, aztréonam; ERT, ertapénème; IPM, imipénème; MEM, méropénème; DOR, doripénème; GEN, gentamicine; AMK, amikacine; CIP, ciprofloxacine; TGC, tigécycline; CST, colistinView LargeLes isolats provenant des patients A-D étaient identiques par PFGE, y compris les isolats résistants à la colistine et résistants à la colistine non illustrés. L’isolat E du patient E était différent des – bandes des isolats des patients A – D et était considéré comme Les expériences de compétition in vitro ont démontré que les isolats résistants à la colistine et résistants à la colistine persistaient dans les cultures en l’absence de colistine pendant des jours entiers. Pour la paire d’isolats B et B, les inoculums initiaux étaient × CFU / mL et × CFU / mL, respectivement. Le jour des passages quotidiens sans colistine, l’isolat B atteignait un inoculum de × CFU / mL% alors que l’inoculum de l’isolat B était × CFU / mL% Pour la paire d’isolats D et D, les inoculums de départ étaient × CFU / mL et × CFU / mL, respectivement, avec l’isolat D croissant à un inoculum de × UFC / mL après passages en% par rapport à × UFC / mL r isoler D% Le passage des isolats résistants seul en l’absence de colistine dans le milieu pendant plusieurs jours a montré une résistance stable à la colistine

DISCUSSION

K pneumoniae producteur de KPC est devenu un agent pathogène hospitalier majeur Colistin, qui était en désuétude depuis des décennies en raison de préoccupations sur la toxicité et la disponibilité d’agents antimicrobiens plus sûrs, constitue maintenant un traitement de première ligne pour le traitement de l’infection causée par cet organisme. Des groupes multiclonaux d’isolats de K pneumoniae résistants à la colistine ont été décrits dans des hôpitaux de Grèce et de Corée du Sud Emergence de résistance à la colistine ou à la polymyxine B chez des K pneumoniae producteurs de KPC au cours d’un traitement par ces médicaments. Des agents ont également été signalés dans des hôpitaux de New York, New York, où l’organisme est épidémique. Des épidémies clonales de K pneumoniae productrices de KPC résistantes à la colistine ont été signalées en Grèce, aux États-Unis et en Hongrie, Ce dernier a été attribué au clone ST [,,] Ce rapport documente un groupe d’organismes résistants à la colistine appartenant aux On sait de plus en plus que ST est le clone prédominant de K pneumoniae produisant du KPC qui est distribué aux États-Unis ainsi que dans le monde entier L’utilisation de la colistine dans notre hôpital était stable entre l’heure des cas décrits ici L’utilisation de Colistin était à des doses quotidiennes définies DDDs par patient-jours en et DDDs par patient-jours en utilisation mensuelle de colistin de janvier à mai était comme suit:,,,, et DDD par patient-jours, respectivement Néanmoins, les patients ont développé K pneumoniae KPC résistante à la colistine tout en recevant du colistiméthate, la formulation intraveineuse de colistine, par jour. Ces événements peuvent donc représenter une émergence de novo de la résistance à la colistine. Cependant, tous les colistin-sensibles initiaux et résistants à la colistine isolats avaient des profils PFGE identiques et appartenaient au même type de séquence, ce qui rendait difficile d’exclure la possibilité d’une dissémination horizontale de Notre examen des cas a montré que, bien que les patients ne se trouvaient pas à proximité immédiate, les patients des patients TICU A-D étaient pris en charge par les mêmes équipes médicales déficit immunitaire. Le quatrième patient C n’avait aucune exposition antérieure à la colistine et probablement Enfin, le cinquième patient E n’a pas été traité avec la colistine et a donc probablement acquis l’organisme résistant à partir d’une source non identifiée lors d’un précédent séjour à l’hôpital alors que le patient B est resté bactériémique avec une colistine. K pneumoniae productrice de KPC résistante pendant plusieurs mois par la suite, aucun nouveau groupe de K pneumoniae résistant à la colistine n’a été trouvé depuis. Néanmoins, avec d’autres rapports récents d’infections causées par K pneumoniae KPC appartenant au clone ST de diverses parties de Dans le monde entier, nos résultats attestent de sa grande capacité de propagation réussie. Développement de la résistance à la colistine sous expérimentation c Ces changements peuvent affecter négativement l’aptitude des organismes résistants à la colistine, en particulier en l’absence de pression sélective de la part de cet agent. Cependant, les organismes résistants à la colistine ont été altérés par des modifications des systèmes régulateurs et des modifications des lipopolysaccharides. La résistance à la colistine dans les isolats cliniques peut survenir par des voies qui ne compromettent pas de manière significative la condition physique. Cette implication, associée à notre observation clinique, soulève la possibilité que Une fois émergés, les organismes résistants à la colistine cliniquement sélectionnés peuvent persister chez les patients et dans l’environnement hospitalier et entraîner une transmission subséquente. En raison de l’utilisation continue de la colistine pour le traitement de divers agents pathogènes à Gram négatif multirésistants, il est probable que nous verrons un nombre croissant de cas d’émergence de novo de résistance et de propagation nosocomiale Soutien financier Ce travail a été soutenu par les subventions des Instituts nationaux de la santé KAI- et RAI-A à YD; Les conflits d’intérêts potentiels YD reçoit un soutien financier de Merck pour travailler sur une autre étude Tous les autres auteurs ne signalent aucun conflit potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE de divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts que les éditeurs considèrent pertinents pour la le contenu du manuscrit a été divulgué dans la section Remerciements