Étude prospective de la co-infection chez des patients atteints d’érythème migrant

La fréquence de la co-infection par Borrelia burgdorferi et Anaplasma phagocytophila ou Babesia microti chez les patients atteints d’érythème migrant, la lésion cutanée initiale de la maladie de Lyme, a été évaluée dans des régions continentales du Rhode Island et du Connecticut. érythème migrant prouvé,% de patients avaient une co-infection avec A phagocytophila et% une co-infection avec B microti Nous avons conclu que la fréquence de la co-infection avec ces agents était faible chez les patients atteints d’érythème migrant dans les zones d’étude

Nous avons utilisé des critères stricts pour évaluer la coinfection chez les patients atteints d’érythème migrant résidant dans des régions continentales du Rhode Island ou du Connecticut où la maladie de Lyme est fortement endémique. Patients et méthodes De bout en bout, un total de patients atteints d’érythème migrant ont été L’étude a été approuvée par le Human Investigations Committee du New England Medical Center de Boston, dans le Massachusetts, et le consentement éclairé a été obtenu de tous les patients. Les patients ont rencontré les critères de surveillance de la maladie de Lyme [Tous les patients avaient « érythème migrant », qui a été défini comme un diamètre de la lésion cutanée annulaire en expansion, ⩾ cm avec ou sans central partiel Après avoir obtenu le consentement éclairé, les médecins ont procédé à une évaluation clinique des signes et symptômes de l’infection au moyen d’une Un biopsie de la peau à la pointe des lésions cutanées à l’érythème migrant a été réalisé pour la culture de B burgdorferi, et un échantillon sanguin EDTA-anticoagulé a été obtenu pour la détection de A phagocytophila et de B microti par PCR. Après un test sérologique, un échantillon de sérum de phase aiguë a été prélevé. Les échantillons ont été envoyés pendant une nuit à New England Medical Center. A la fin du traitement antibiotique ~ semaines plus tard, un échantillon de sérum en phase convalescente a été prélevé. des échantillons de biopsie ont été cultivés pour B burgdorferi dans un milieu modifié de Barbour-Stoenner-Kelly II BSK-H; Sigma, et un test sérologique pour B burgdorferi a été réalisée en utilisant un test ELISA-approche et Western blot B burgdorferi a été cultivé à partir de lésions cutanées érythème migrans de% des patients qui ont été vus sur les sites d’étude sur le terrain Pour être certain du diagnostic de Lyme Pour les tests de co-infection, nous avons utilisé une lignée de cellules leucémiques HL infectées par A phagocytophila et des lignées cellulaires de lignée cellulaire leucémiques HL non infectées ont été aimablement fournies par le Dr Jesse Goodman, Université du Minnesota, Minneapolis, Des échantillons de sang citratés obtenus à partir de hamsters dorés femelles infectés avec des échantillons de sang microti B ont été fournis par le Dr Sam Telford de la Harvard School of Public Health à Boston, MA. un kit commercial Isoquick; Orca Research Après extraction, le culot d’ADN a été resuspendu en μL de HO Pour la détection de l’ADN d’A phagocytophila, une séquence spécifique du gène S rRNA a été ciblée, et l’amplification a été réalisée selon la méthode décrite par Pancholi et al. extraites de cellules HL infectées par A phagocytophila, et le témoin négatif était des cellules HL non infectées. Pour la détection de l’ADN microti B, un gène ss-ARNr de B microti a été ciblé et une amplification a été réalisée comme décrit par Persing et al. le contrôle était de l’ADN extrait de sang humain infecté par microti B Pour les deux agents infectieux, un contrôle de l’eau était inclus Les produits d’amplification étaient visualisés sur des gels d’agarose colorés au bromure d’éthidium pour des tests sérologiques, des lames d’essai d’immunofluorescence indirecte Cel-Line; Erie Scientific ont été préparés avec des antigènes A phagocytophila ou des antigènes B microti, comme décrit ailleurs Les lames ont été criblées par immunofluorescence indirecte à une: dilution pour la détection des anticorps IgM ou IgG anti-A phagocytophila et à: dilution pour la détection des anticorps IgM ou IgG anti-B microti Pour les deux agents, les échantillons ayant donné des résultats positifs aux dilutions de dépistage ont été titrés jusqu’au point final, et des échantillons provenant de patients avec des résultats de PCR positifs ont été testés à dilutions inférieures Le point final était défini comme le titre le plus élevé dans lequel tous les organismes étaient encore faiblement fluorescents. De plus, pour la normalisation et le contrôle de la procédure, le même titre positif, le même titre négatif et le même contenu. ont été inclus avec chaque testResults From through, sur les sites d’étude du continent dans le sud de Rhode Island et le sud-est du Connecticut, les patients avaient érythème migraneux Lésions cutanées à partir desquelles B burgdorferi a été cultivé Parmi ces patients,% présentaient une co-infection avec A phagocytophila et% présentaient une co-infection avec B microti. Tous les patients ont présenté un érythème migrant de mai à septembre et des patients%, y compris les co-infectés A phagocytophila ou B microti, apparition des symptômes en juin ou juillet L’incidence annuelle de co-infection avec A phagocytophila ou B microti sur les sites d’étude variait de à cas par patients atteints d’érythème migrant La fréquence globale de co-infection au cours de l’étude prospective était cas par patient

Tableau View largeTélécharger Diapositive Très fréquente sur les sites d’étude de la co-infection avec Borrelia burgdorferi et Anaplasma phagocytophila ou Babesia microti chez les patients atteints d’érythème migrantTable View largeTéléchargement diapositive Incidence rapide sur les sites d’étude de la co-infection avec Borrelia burgdorferi et Anaplasma phagocytophila ou Babesia microti chez les patients atteints d’érythème Les patients co-infectés pour lesquels les cultures des échantillons de biopsie étaient positifs pour B burgdorferi avaient également des réponses IgM positives au spirochète. De plus, les patients présentant une co-infection par A phagocytophila présentaient des résultats positifs pour l’ADN d’A phagocytophila dans le sang et une réponse IgG positive Chez les patients avec une co-infection B microti, on a obtenu un résultat PCR positif pour l’ADN microti B dans le sang et une réponse IgG positive pour cet organisme et l’autre avait une séroconversion IgG dans l’organisme Un patient supplémentaire avait une réponse IgG anti-A phagocytophila de: dans les deux aigus Cependant, ce patient n’a pas été inclus dans la série des cas, car la co-infection ne pouvait pas être distinguée de l’infection séquentielle. Pour les deux agents, les résultats de PCR étaient reproductibles lors de tests successifs. Les deux patients avec une co-infection à A phagocytophila et un patient avec une co-infection par le microti B avaient des symptômes associés à l’érythème migrant, y compris le malaise, la fatigue, la fièvre, les frissons, les maux de tête, le cou. Cependant, le patient restant co-infecté par B microti n’a présenté aucun symptôme associé. Les patients co-infectés ont été traités par doxycycline, et la résolution de la maladie s’est révélée dans une durée médiane de plusieurs jours. qui a été co-infecté avec A phagocytophila, avait une fatigue persistante Lorsque le p Les images des patients atteints d’une infection à B burgdorferi seuls ont été comparées à celles des patients co-infectés, les patients co-infectés avaient tendance à avoir plus de symptômes, mais leurs tableaux cliniques manquaient de caractéristiques distinctives

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques des patients avec ou sans coinfectionTable View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques des patients avec ou sans co-infectionDiscussion Dans cette étude prospective des patients atteints d’érythème migrant prouvé en culture, les patients présentaient une co-infection avec A phagocytophila et présentaient une co-infection. B microti Dans une sérosurveillance initiale dans laquelle les tests ont été réalisés par immunofluorescence indirecte,% des résidents de Long Island avec anticorps anti-B burgdorferi avaient également des sérums microti-réactifs B Dans une sérosurveillance des résidents du Connecticut réalisée par ELISA avec un conjugué polyvalent,% des patients qui avaient des titres élevés d’anticorps dirigés contre B burgdorferi avaient aussi des anticorps dirigés contre B microti, et des patients avaient des anticorps dirigés contre Ehrlichia equi , un organisme étroitement apparenté à A. phagocytophila dans un récent sondage sérologique des résidents du Connecticut ou du Rhode Island. burgdorferi a été réalisée par ELISA Le Western blot et le test de A phagocytophila ont été réalisés par ELISA avec une protéine HGE recombinante http://sildenafilca.org. Dans cette étude,% des patients ayant des réponses IgG positives à B burgdorferi ont également eu des réponses IgG positives à A phagocytophila, et% des personnes Les méthodes sérologiques peuvent ne pas distinguer entre co-infection et infection séquentielle. Plus important encore, les tests sérologiques peuvent ne pas être complètement spécifiques. Par exemple, une réponse IgM positive à A phagocytophila peut provoquer une réponse IgM positive à A phagocytophila. Plus récemment, des études prospectives ont été réalisées dans lesquelles des patients atteints d’érythème migrant ou de maladie fébrile aiguë ont été testés pour co-infection par examen microscopique de frottis sanguins, analyse PCR d’échantillons sanguins et tests sérologiques de patients. avec la maladie de Lyme à Block Island, Rhode Island,% avaient également des signes de babésiose De patients avec Enfin, dans une étude portant sur des patients atteints de la maladie de Lyme, de la babésiose ou de l’anaplasmose à Block Island, Nantucket Island, Massachusetts, ou dans le sud-est du Connecticut,% présentaient des signes d’infection à Ehrlichiosis granulocytaire humain. La maladie de Lyme et la babésiose ont été le plus souvent observées chez des patients atteints de la maladie de Lyme . L’étude de Kraus et al. [1] a montré que la maladie de Lyme s’accompagnait souvent de coïnfection. La méthodologie est probablement un facteur principal Notre étude prospective a examiné seulement les patients avec érythème migrant prouvé en culture, et la co-infection a été documentée par PCR ou Seroconversion IgG Par conséquent, la plus faible incidence de co-infection dans notre étude peut être due en partie à la rigueur rencontrée hods utilisés pour documenter une infection active avec chacun des agents étudiés et, peut-être, des différences annuelles dans la fréquence des tiques co-infectées dans différentes localisations géographiques. L’albaplasmose ou la babésiose ne provoque souvent qu’une infection légère ou asymptomatique Dans une sérosurveillance,% des patients ayant des anticorps contre B microti aucun symptôme de l’infection Cependant, l’anaplasmose et la babésiose peuvent être plus sévères chez les personnes âgées , et chez les personnes très jeunes, plus âgées ou aspléniques, B microti peut entraîner une maladie grave ressemblant à celle du paludisme les patients sont co-infectés avec B burgdorferi et B microti et / ou A phagocytophila, ils peuvent présenter un plus grand nombre de symptômes non spécifiques; en particulier, fièvre, frissons, maux de tête, et surtout fatigue qui peut persister plus longtemps Conformément à ces observations, les tableaux cliniques de nos patients co-infectés comportaient un grand nombre de symptômes, et le patient co-infecté présentait une fatigue persistante après traitement. Dans l’ensemble, l’impact de la co-infection chez nos patients atteints d’érythème migrant semblait faible. En résumé, la fréquence de la co-infection chez les patients de l’étude actuelle était faible. Néanmoins, il est important que les médecins être conscient de la possibilité de co-infection chez les patients atteints d’érythème migrant, car dans certains cas, ces agents co-infectants peuvent causer une maladie grave, voire mortelle

Remerciements

Nous remercions Marcia Pellegrino et Norma Grills pour l’aide aux patients, Dr Jesse Goodman et Dr Sam Telford pour avoir fourni des lignées cellulaires infectées pour des tests de laboratoire, et Colleen Fitzpatrick pour l’aide à la préparation du manuscrit